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干化學(xué)法與免疫膠體金法在尿液潛血檢測中的應(yīng)用
干化學(xué)法與免疫膠體金法在尿液潛血檢測中的應(yīng)用【1】
摘要：目的 比較尿液潛血檢測中干化學(xué)法與免疫膠體金法的結(jié)果。
方法 對我院2012年6月～2014年6月收治的146例泌尿腎病科患者尿液樣本分別進行干化學(xué)法和免疫膠體金法檢驗，比較檢驗結(jié)果。
結(jié)果 干化學(xué)法假陰性為0.0%，假陽性為8.90%，免疫膠體金法假陽性為0.0%，假陰性為0.68%，結(jié)果具有顯著差異(P<0.05)。
結(jié)論 尿潛血試驗中免疫膠體金法在靈敏度上要比干化學(xué)法弱，但特異度方面要較干化學(xué)法強，因此臨床中可將兩種方法有機結(jié)合起來，以提高檢測結(jié)果的靈敏度和特異度。
關(guān)鍵詞：干化學(xué)法;免疫膠體金法;尿液潛血
尿液潛血試驗是尿常規(guī)檢查中的一項，是尿路感染及腎臟疾病診斷中的一個重要指標(biāo)，目前臨床中用于尿液潛血試驗的方法有干化學(xué)法和免疫膠體金法[1]。
為進一步探討兩種方法在尿液潛血檢測中的應(yīng)用，特選取我院患者作為研究對象。
1 資料與方法
1.1一般資料 將我院2012年6月～2014年6月收治的146例泌尿腎病科患者作為此次研究的主要對象，其中女69例，男77例，年齡18～60歲，平均年齡(36.8±3.2)歲。
1.2方法 在早晨進行患者首次中段尿的取樣，需要注意的是，必須在2h內(nèi)進行三種比較重要的檢驗，即膠體金單克隆抗體隱血試驗、紅細胞鏡檢以及干化學(xué)檢測。
通過嚴(yán)密的操作和實驗，得出精確的實驗結(jié)果，并進行一定的記錄工作，確保各種數(shù)據(jù)的有效性和適用性。
1.3尿液潛血檢驗結(jié)果的判斷標(biāo)準(zhǔn) 陽性：鏡檢(+)，免疫膠體金法(+)，干化學(xué)法陰血(+);陰性：鏡檢(-)，免疫膠體金法(-)，干化學(xué)法陰血(-);假陽性：鏡檢(-)，免疫膠體金法(-)，干化學(xué)法陰血(+);假陰性：鏡檢(+)，免疫膠體金法(+)，干化學(xué)法陰血(-)。
1.4統(tǒng)計學(xué)分析 通過利用SPSS20.O軟件將此次研究的數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計和分析，其中計數(shù)的資料的比較要行χ2檢驗，以P<0.05為差異具有一定的統(tǒng)計學(xué)意義。
2 結(jié)果
干化學(xué)法假陰性為0.0%，假陽性為8.90%，免疫膠體金法假陽性為0.0%，假陰性為0.68%，結(jié)果具有顯著差異(P<0.05)，見表1。
3 討論
在進行尿液潛血檢測的過程中，必須要進行嚴(yán)格的觀察和實驗，確保檢測的結(jié)果具有較高的靈敏度和特異度，從而為臨床治療提供寶貴的參考資料，提升醫(yī)療檢測的質(zhì)量和水平，例如在對患者進行臨床檢驗的過程中，如果患者的鏡檢紅細胞呈陰性，但尿液潛血檢測結(jié)果是呈陽性，就應(yīng)該考慮是不是患者的泌尿道劃傷或者在血管的內(nèi)外存在著溶血的現(xiàn)象，一般要對患者進行復(fù)診，但是復(fù)診會增加病患的醫(yī)療負擔(dān)，并且很容易引發(fā)醫(yī)患糾紛。
因此必須使用先進的檢測技術(shù)進行高效檢測，而干化學(xué)法和免疫膠體金法在尿液潛血檢測中的應(yīng)用使得檢測的結(jié)果有了很大的保障[2、3]。
干化學(xué)法是將液體檢測樣品加到特定的干燥試劑條上，通過被測樣品的水分來實現(xiàn)特定的化學(xué)反應(yīng)，再進行以酶為基礎(chǔ)的干化學(xué)分析，其原理是根據(jù)紅細胞中血紅蛋白所含的血紅素具有類似過氧化物酶的作用，通過血紅素催化分解過氧化氫，釋放出新生態(tài)氧，使鄰聯(lián)甲苯胺氧化呈色，從而達到檢測隱血的目的，利用這種自動化的儀器可以對尿液中的一些成分進行檢測，并且使用的標(biāo)本少，操作簡單快捷，適合進行疾病篩查和臨床疾病的普查
但由于尿液中的成份很復(fù)雜，常存在一些類似過氧化物酶活性的物質(zhì)，如肌紅蛋白、某些細菌繁殖代謝產(chǎn)物等因素可造成干化學(xué)隱血結(jié)果的假陽性，而還原型谷胱苷肽、維生素C等還原劑存在時，可競爭性抑制反應(yīng)，導(dǎo)致干化學(xué)法隱血檢測結(jié)果出現(xiàn)假陰性。
干化學(xué)法隱血陽性可通過鏡檢紅細胞的存在來證實，但鏡檢未發(fā)現(xiàn)紅細胞的現(xiàn)象在臨床檢驗中也很常見，這既可能是紅細胞溶解導(dǎo)致僅有游離血紅蛋白存在，也可能是干化學(xué)法檢測隱血出現(xiàn)了假陽性;干化學(xué)法隱血陰性可能是真陰性，但也不能排除由于檢測敏感性不足或維生素C、還原型谷胱苷肽等還原劑存在而導(dǎo)致的假陰性。
因此，臨床檢驗中必須要控制好尿液放置的時間、陽光的照射以及藥物性等，按照規(guī)定的要求進行操作，避免不利因素對檢測結(jié)果的影響。
使用該儀器可以把催化之后的氧化氫當(dāng)做電子受體，從而實現(xiàn)色源的氧化呈色，以達到便于分析檢測結(jié)果的目的[4、5]。
免疫膠體金法其實是一種新的免疫標(biāo)記技術(shù)法，能夠有效地利用膠體金來作為示蹤標(biāo)記物，觀察應(yīng)用之后的特異性原抗體反應(yīng)。
該技術(shù)的標(biāo)記物制作簡單，不需要使用一些放射性的同位素，也不需要熒光顯微鏡，使用的方法具有一定的敏感性和特異性，而且應(yīng)用廣泛，不僅適用于液相免疫測定，而且更適用于固相免疫分析、流式細胞術(shù)等領(lǐng)域。
但是免疫膠體金技術(shù)也存在著不足，在檢測的過程中會經(jīng)常出現(xiàn)漏洞，它檢測的靈敏度以及可重復(fù)性也有待提升，并且膠體金顆粒本身也具有一定的局限性，因此以其為依托的免疫膠體金技術(shù)也是存在局限的，例如清潔度要求高、膠體金溶液穩(wěn)定差、膠體金顆粒大、滲透能力大等都會影響到檢測的結(jié)果。
在患者的尿液中存在著有機紅蛋白，并且尿液中的雜質(zhì)具有過氧化酶相似的活性，尿液樣本中的13例在鏡顯中沒有發(fā)現(xiàn)紅細胞，但是免疫膠體金技術(shù)檢測的結(jié)果為陰性，通過兩種技術(shù)的對比分析發(fā)現(xiàn)，13例樣本呈假陽性。
由此可見，干化學(xué)法在進行尿液潛血檢測時具有較高的靈敏度，可以被運用到臨床篩查中，但是它也存在著缺點，其特異性并不高，很容易在進行結(jié)果檢測時出現(xiàn)一定的誤差，對患者的病情造成誤診，增加診斷費用，引發(fā)醫(yī)患糾紛。
同時，在本次實驗當(dāng)中，110例尿液樣本經(jīng)過免疫膠體金法進行檢測全部呈陽性，它的檢測效率比干化學(xué)法檢測的效率要高，并且兩者之間的差異存在著統(tǒng)計學(xué)意義，但是有2例樣本在高倍顯微鏡下呈陽性，而免疫膠體金法檢測的結(jié)果卻是陰性，出現(xiàn)這種狀況是因為樣本尿液的紅細胞含量低，超出了其檢測的范圍，使得檢測的結(jié)果出現(xiàn)了誤差。
通過此次試驗結(jié)果的分析可以明確的指示，免疫膠體金法在靈敏度上要比干化學(xué)法弱，而在特異度方面要比干化學(xué)法強，因此在進行對病患的尿液潛血檢測的過程中，要將兩種方法有機結(jié)合起來，確保檢測結(jié)果具有較高的靈敏度和特異度，提升檢測工作的質(zhì)量和水平。
參考文獻：
[1]楊宗樹，張蕾.兩種方法檢驗?zāi)驖撗栃缘臏?zhǔn)確度比較[J].吉林醫(yī)學(xué)，2012，33(29)：6301.
[2]郭寶麗.干化學(xué)法尿潛血異常結(jié)果分析[J].醫(yī)學(xué)檢驗與臨床，2011，22(4)：100.
[3]王樹林.單純干化學(xué)法檢測尿液潛血假陽性鑒別與分析[J].內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)雜志，2013，45(4)：483-484.
[4]聶宗杰.不同檢驗方法對尿潛血陽性的準(zhǔn)確度分析[J].現(xiàn)代診斷與治療，2013，4(8)：1847-1848.
[5]張翠玲，王貞，白洪濤，等.一種鑒別尿潛血假陽性的方法[J].大連醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2011，33(1)：94-95.
干化學(xué)法與免疫膠體金法在尿液潛血檢測中的應(yīng)用【2】
[摘要] 目的 探討干化學(xué)法和免疫膠體金法在尿液潛血檢測中的差異，為尿液潛血臨床治療提供可靠的參考資料。
方法 將該院在2012年7月―2013年7月所治療的252例腎病患者作為此次研究的主要對象，分別給予免疫膠體金法、干化學(xué)法檢驗，兩種檢驗組分別為實驗組和對照組。
利用人工顯微鏡技術(shù)對其質(zhì)量進行監(jiān)控，采用統(tǒng)計學(xué)對患者的檢測結(jié)果進行對比分析，研究其靈敏度和特異度的差異。
結(jié)果 用免疫膠體金法測得的結(jié)果表明，有0例假陽性患者，有3例假陰性患者，并且其概率是1.20%;用干化學(xué)法測得的結(jié)果顯示，有0例假陰性患者，有56例假陽性患者，并且其概率為22.22%。
結(jié)論 干化學(xué)法檢測的靈敏度比免疫膠體金檢測的靈敏度強，而免疫膠體金檢測的特異度比干化學(xué)法檢測的特異度要強，值得臨床推廣應(yīng)用。
[關(guān)鍵詞] 干化學(xué)法;免疫膠體金法;尿液;臨床效果
在進行尿液潛血的實驗中，一般采用的是干化學(xué)法，而干化學(xué)法檢測尿液潛血存在著一定的不足，例如在假陽性和假陰性的檢測上還有一定的缺陷[1]，而免疫膠體金法的應(yīng)用可以對其進行有效的彌補，通過兩者之間的對比來進行差異分析，從而不斷地提升尿液潛血檢測工作的靈敏度和特異度。
為探討干化學(xué)法和免疫膠體金法在尿液潛血檢測中的差異，為尿液潛血臨床治療提供可靠的參考資料，該研究選擇該院在2012年7月―2013年7月所治療的252例腎病患者作為對象進行研究，現(xiàn)報道如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料
選取該院治療的252例腎病患者作為此次研究的主要對象，隨機分成兩組，實驗組為免疫膠體金法組，對照組為干化學(xué)法組，在病患當(dāng)中有138例為女性，114例為男性，年齡1～23歲，平均年齡(9.12±0.36)歲。
1.2 檢測方法
要在早晨進行患者首次中斷尿的取樣，需要注意的是，必須在兩個小時內(nèi)進行三種比較重要的檢驗，即膠體金單克隆抗體隱血試驗、紅細胞鏡檢以及干化學(xué)檢測。
通過嚴(yán)密的操作和實驗，得出精確的實驗結(jié)果，并進行一定的記錄工作，確保各種數(shù)據(jù)的有效性和適用性，為之后的尿液潛血分析提供寶貴的參考資料。
1.3 尿液潛血檢驗結(jié)果的判斷標(biāo)準(zhǔn)
陽性：鏡檢(�)，免疫膠體金法(�)，干化學(xué)法陰血(�);陰性：鏡檢(�)，免疫膠體金法(�)，干化學(xué)法陰血(�);假陽性：鏡檢(�)，免疫膠體金法(�)，干化學(xué)法陰血(�);假陰性：鏡檢(�)，免疫膠體金法(�)，干化學(xué)法陰血(�)。
1.4 統(tǒng)計方法
對實驗的結(jié)果進行統(tǒng)計分析。
通過利用SPSS14.0軟件將此次研究的數(shù)據(jù)進行仔細的統(tǒng)計和分析，其中計數(shù)資料用χ2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
2 結(jié)果
對照組假陰性為0.0%，假陽性為22.22%，觀察組假陽性為0.0%，假陰性為1.20%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，具體的檢測數(shù)據(jù)如表1所示。
表1 兩組患者的尿潛血檢驗結(jié)果比較[n(%)]
3 討論
3.1 干化學(xué)法的含義以及臨床應(yīng)用
干化學(xué)法分析技術(shù)是將液體檢測樣品加到特定的干燥試劑條上，通過被測樣品的水分來實現(xiàn)特定的化學(xué)反應(yīng)，再進行以酶為基礎(chǔ)的干化學(xué)分析，這就是所謂的干化學(xué)法分析技術(shù)。
其原理是根據(jù)紅細胞中血紅蛋白所含的血紅素具有類似過氧化物酶的作用，通過血紅素催化分解過氧化氫，釋放出新生態(tài)氧，使鄰聯(lián)甲苯胺氧化呈色，從而達到檢測隱血的目的[2]。
干化學(xué)法分析技術(shù)不僅僅被廣泛的應(yīng)用于定性檢查，而且還可以進行半定量和定量的深入分析，為臨床檢測提供了更大的便利。
且干化學(xué)法分析技術(shù)通常是運用反射光度法或者是差示電極法來進行測量的，具有準(zhǔn)確度高和測量速度快的特點，操作簡單易行，不需要進行任何試劑儲備或是試劑配制，而且其中的多層膜會對干擾性的物質(zhì)進行過濾，產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)的水分來源于標(biāo)本液體成分，可以有效地提升檢測的靈敏度[3]。
但由于尿液中的成份很復(fù)雜，常存在一些類似過氧化物酶活性的物質(zhì)，如肌紅蛋白、某些細菌繁殖代謝產(chǎn)物等因素可造成干化學(xué)隱血結(jié)果的假陽性，而還原型谷胱苷肽、維生素C等還原劑存在時，可競爭性抑制反應(yīng)，導(dǎo)致干化學(xué)法隱血檢測結(jié)果出現(xiàn)假陰性。
干化學(xué)法隱血陽性可通過鏡檢紅細胞的存在來證實，但鏡檢未發(fā)現(xiàn)紅細胞的現(xiàn)象在臨床檢驗中也很常見，這既可能是紅細胞溶解導(dǎo)致僅有游離血紅蛋白存在(低滲尿液中紅細胞溶解更為明顯)，也可能是干化學(xué)法檢測隱血出現(xiàn)了假陽性;干化學(xué)法隱血陰性可能是真陰性，但也不能排除由于檢測敏感性不足或維生素C、還原型谷胱苷肽等還原劑存在而導(dǎo)致的假陰性。
且干化學(xué)法分析技術(shù)中在使用差示電極法原理時，其中的多膜片只能使用一次。
在該研究中，對照組假陰性為0.0%，假陽性為22.22%，表明存在一定的假陽性及假陰性問題。
3.2 免疫膠體金法的含義以及臨床應(yīng)用
免疫膠體金法其實是一種新的免疫標(biāo)記技術(shù)法，主要是利用免疫學(xué)方法來對尿液潛血給予檢測，能夠有效地利用膠體金來作為示蹤標(biāo)記物，觀察應(yīng)用之后的特異性原抗體反應(yīng)。
膠體金標(biāo)記技術(shù)就是蛋白質(zhì)分子吸附在膠體金顆粒表面的過程，因為紅色的膠體金顆粒遇到相應(yīng)的抗原或是抗體就會聚集起來，達到一定密度就會呈現(xiàn)出肉眼可見的紅色，所以在尿液潛血的檢測中被推廣利用[4]。
免疫膠體金技術(shù)在臨床應(yīng)用中具有可操作性，膠體金顆粒對于蛋白質(zhì)分子的吸附主要是依據(jù)PH值，如果膠體金的PH值比蛋白質(zhì)分子的等電點低，就會在聚集的同時不具備結(jié)合的能力，此外膠體金顆粒的離子強度、蛋白質(zhì)分子量等也會影響到兩者的結(jié)合[5]。
但是這種技術(shù)的標(biāo)記物制作簡單，不需要使用一些放射性的同位素，也不需要熒光顯微鏡，使用的方法具有一定的敏感性和特異性，而且應(yīng)用廣泛，不僅適用于液相免疫測定，而且更適用于固相免疫分析、流式細胞術(shù)等領(lǐng)域[2]。
在該研究中，觀察組假陽性為0.0%，假陰性為1.20%，表明該方法檢測尿液潛血不會具有假陽性問題，可有效解決干化學(xué)法所導(dǎo)致的假炎性問題。
但是免疫膠體金技術(shù)也存在著不足，在檢測的過程中會經(jīng)常出現(xiàn)漏洞，它檢測的靈敏度以及可重復(fù)性也有待提升，并且膠體金顆粒本身也具有一定的局限性，因此，以其為依托的免疫膠體金技術(shù)也是存在局限的，例如清潔度要求高、膠體金溶液穩(wěn)定差、膠體金顆粒大、滲透能力大等都會影響到檢測的結(jié)果。
3.3 干化學(xué)法和免疫膠體金法在尿液潛血檢測中的比較應(yīng)用
在進行尿液潛血檢測的過程中，必須要進行嚴(yán)格的觀察和實驗，確保檢測的結(jié)果具有較高的靈敏度和特異度，從而為臨床治療提供寶貴的參考資料，提升醫(yī)療檢測的質(zhì)量和水平，例如在對患者進行臨床檢驗的過程中，如果患者的鏡檢紅細胞呈陰性，但尿液潛血檢測結(jié)果是呈陽性，就應(yīng)該考慮是不是患者的泌尿道劃傷或者在血管的內(nèi)外存在著溶血的現(xiàn)象，一般要對患者進行復(fù)診，但是復(fù)診會增加病患的醫(yī)療負擔(dān)，并且很容易引發(fā)醫(yī)患糾紛[6]，因此，必須使用先進的檢測技術(shù)進行高效檢測，而干化學(xué)法和免疫膠體金法在尿液潛血檢測中的應(yīng)用使得檢測的結(jié)果有了很大的保障。
對于檢測的結(jié)果分析主要是通過干化學(xué)法尿液分析儀，利用這種自動化的儀器可以對尿液中的一些成分進行檢測，并且使用的標(biāo)本少，操作簡單快捷，適合進行疾病篩查和臨床疾病的普查，但是必須要控制好尿液放置的時間、陽光的照射以及藥物性等，按照規(guī)定的要求進行操作，避免不利因素對檢測結(jié)果的影響。
使用該儀器可以把催化之后的氧化氫當(dāng)作電子受體，從而實現(xiàn)色源的氧化呈色，以達到便于分析檢測結(jié)果的目的[7]。
在患者的尿液中存在著有機紅蛋白，并且尿液中的雜質(zhì)具有過氧化酶相似的活性，尿液樣本中的56例在鏡顯中沒有發(fā)現(xiàn)紅細胞，但是免疫膠體金技術(shù)檢測的結(jié)果為陰性，通過兩種技術(shù)的對比分析發(fā)現(xiàn)，56例樣本呈假陽性[8]。
由此可見，干化學(xué)法在進行尿液潛血檢測時具有較高的靈敏度，可以被運用到臨床篩查中，但是它也存在著缺點，其特異性并不高，很容易在進行結(jié)果檢測時出現(xiàn)一定的誤差，對患者的病情造成誤診，增加診斷費用，引發(fā)醫(yī)患糾紛。
同時，在該實驗當(dāng)中，有156例尿液樣本經(jīng)過免疫膠體金法進行檢測全部呈陽性，它的檢測效率比干化學(xué)法檢測的效率要高，優(yōu)化率為73.83%，并且兩者之間的差異有統(tǒng)計學(xué)意義，即P<0.05。
但是有3例樣本在高倍顯微鏡下呈陽性，而免疫膠體金法檢測的結(jié)果卻是陰性，出現(xiàn)這種狀況是因為樣本尿液的紅細胞含量低，超出了其檢測的范圍，使得檢測的結(jié)果出現(xiàn)了誤差。
通過此次試驗結(jié)果的分析可以明確的指示，免疫膠體金法在靈敏度上要比干化學(xué)法弱，而在特異度方面要比干化學(xué)法強，因此，在進行對病患的尿液潛血檢測的過程中，要將兩種方法有機結(jié)合起來，確保檢測結(jié)果具有較高的靈敏度和特異度，提升檢測工作的質(zhì)量和水平。
[參考文獻]
[1] 田利榮，孫恒壽，張慶賢，等.尿液干化學(xué)法和鏡檢法檢測尿液紅細胞結(jié)果與性別因素的分析[J].中國社區(qū)醫(yī)師：醫(yī)學(xué)專業(yè)，2012，14(20)：261-262.
[2] 徐新，羅春麗，蒲軍，等.干化學(xué)法尿隱血檢測的可靠性分析[J].重慶醫(yī)學(xué)，2012，41(18)：1802-1804.
[3] 楊宗樹，張蕾.兩種方法檢驗?zāi)驖撗栃缘臏?zhǔn)確度比較[J].吉林醫(yī)學(xué)，2012，33(29)：6301.
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[5] 張翠玲，王貞，白洪濤，等.一種鑒別尿潛血假陽性的方法[J].大連醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2011，33(1)：94-95.
[6] 王樹林.單純干化學(xué)法檢測尿液潛血假陽性鑒別與分析[J].內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)雜志，2013，45(4)：483-484.
[7] 孔京慧，宋銀森.干化學(xué)法、免疫膠體金法在兒童尿液潛血檢測方面特異性的差異[J].中國保健營養(yǎng)，2013，23(2下旬刊)：993-993.
[8] 聶宗杰.不同檢驗方法對尿潛血陽性的準(zhǔn)確度分析[J].現(xiàn)代診斷與治療，2013(8)：1847-1848.
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