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醫(yī)學(xué)研究生開設(shè)流式細胞檢測術(shù)課程的初步探討論文
【關(guān)鍵詞】 醫(yī)學(xué)研究生；流式細胞術(shù)；課程
流式細胞術(shù)（flow cytometry FCM）作為一門生物監(jiān)測技術(shù)已得到廣泛應(yīng)用，涉及細胞生物學(xué)、分子生物學(xué)、腫瘤學(xué)、血液學(xué)、免疫學(xué)、遺傳學(xué)等方面［1］，具有檢測速度快、測量指標多、采集數(shù)據(jù)量大、分析全面、精度高、方法靈活等特點。流式細胞作為一項重要技術(shù)也成為研究生學(xué)習(xí)的重要內(nèi)容，但目前在醫(yī)學(xué)研究生教學(xué)中開展流式細胞檢測技術(shù)課程的院校很少。本文就醫(yī)學(xué)研究生開設(shè)流式細胞檢測術(shù)課程的初步探討。
1流式細胞術(shù)在基礎(chǔ)研究中的應(yīng)用
流式細胞儀的工作原理是將待測細胞經(jīng)特異性熒光染料染色后放入樣品管中，在氣體的壓力下進入充滿鞘液的流動室。在鞘液的約束下細胞排成單列由流動室的噴嘴噴出，形成細胞柱，后者與入射的激光束垂直相交，液柱中的細胞被激光激發(fā)產(chǎn)生熒光。儀器中一系列光學(xué)系統(tǒng)（透鏡、光闌、濾片和檢測器等）收集熒光、光散射、光吸收或細胞電阻抗等信號，計算機系統(tǒng)進行收集、儲存、顯示并分析被測定的各種信號，對各種指標做出統(tǒng)計分析［2］。流式細胞檢測技術(shù)目前已成為研究生在完成科學(xué)研究中廣泛采用的研究手段。主要應(yīng)用有：①染色體核型分析；②檢測特異基因編碼的細胞分子；③家畜性別預(yù)選擇；④快速微生物鑒定等。
2流式細胞術(shù)在臨床醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用
2.1在腫瘤學(xué)中的應(yīng)用
FCM在腫瘤學(xué)中應(yīng)用最早。首先需要把實體瘤組織解聚、分散制備成單細胞懸液，用熒光染料（碘化吡啶PI）染色后對細胞的DNA含量進行分析，將不易區(qū)分的群體細胞分成三個亞群（G1期，S期和G2期），DNA含量直接代表細胞的倍體狀態(tài)、非倍體細胞與腫瘤惡性程度有關(guān)。臨床醫(yī)師可以根據(jù)細胞周期各時相的分布情況，設(shè)計最佳的治療方案，及時選用有效的藥物，對瘤細胞達到最大的殺傷效果［23］。
2.2在臨床細胞免疫中的作用
FCM通過熒光抗原抗體檢測技術(shù)對細胞表面抗原分析，進行細胞分類和亞群分析。這一技術(shù)對于人體細胞免疫功能的評估以及各種血液病及腫瘤的診斷和治療有重要作用。
2.3在血液病診斷和治療中的應(yīng)用
FCM通過對外周血細胞或骨髓細胞表面抗原和DNA的檢測分析，對各種血液病的診斷、預(yù)后判斷和治療起著舉足輕重的作用。主要有：①白血病的診斷和治療；②其它種類血液病的診斷和治療監(jiān)測；③網(wǎng)織紅細胞的測定及臨床應(yīng)用。
2.4在血栓與出血性疾病中的應(yīng)用
正常情況下血小板以分散狀態(tài)在血管內(nèi)運行，但當(dāng)血管損傷、血流改變或受到化學(xué)物質(zhì)刺激時血小板被活化而發(fā)生一系列改變。由于血小板的活化程度可由血小板膜糖蛋白表達水平的高低來判斷，F(xiàn)CM測定血小板膜糖蛋白的表達情況成為檢查血小板功能的一種新手段。
除上述臨床應(yīng)用外，流式細胞還逐漸成為一種常規(guī)的檢驗手段。為了得到準確的細胞計數(shù)分析結(jié)果，目前有多個廠家將FCM技術(shù)應(yīng)用到血細胞計數(shù)儀上進行白細胞五項分類計數(shù)和網(wǎng)織紅細胞計數(shù)與分析。這種方法速度快、結(jié)果準確可靠。另外，流式細胞在體液檢查也具有重要的作用［1］。
3開設(shè)流式細胞檢測術(shù)課程的意義
醫(yī)學(xué)研究生的培養(yǎng)，不僅要使其掌握醫(yī)學(xué)基本知識與臨床技能，更重要的是讓其具備跟蹤醫(yī)學(xué)進展的能力，進而自我完善、不斷創(chuàng)新。流式細胞檢測技術(shù)已滲入科研及臨床工作的各個方面，貫穿于基礎(chǔ)研究及臨床檢驗等。但目前的研究生教育中，還沒有系統(tǒng)的開展流式細胞檢測技術(shù)的課程。研究生在科研及臨床檢驗中對流式細胞術(shù)的檢測原理、臨床應(yīng)用、數(shù)據(jù)分析與處理等并不清楚，這樣就限制類流式細胞術(shù)在科研及臨床工作中的應(yīng)用及普及，對提高臨床檢測及診斷水平非常不利。研究生在學(xué)習(xí)中可以將流式細胞技術(shù)視為一種媒介手段，通過對該技術(shù)的學(xué)習(xí)，可以了解涵蓋醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的全部內(nèi)容，掌握醫(yī)學(xué)最新的知識內(nèi)容和發(fā)展動態(tài)；可以掌握科研方法和程序，通過動手實踐培養(yǎng)實事求是的科研態(tài)度以及善于發(fā)現(xiàn)問題和提出創(chuàng)新性課題的能力［3］，對培養(yǎng)適應(yīng)21世紀要求的復(fù)合型科研及臨床工作人員具有重要意義。
【參考文獻】
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［3］ 郭光金，余匯洋，蔣登金，等.碩士研究生顯微外科技術(shù)課程設(shè)置及教學(xué)體會［J］.局解手術(shù)學(xué)雜志，2003,12(1):64-65.
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